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4小時出結果!翼和生物端粒酶檢測試劑盒效率解析
發布時間: 2026-09-03 點擊次數: 53次在科研和工業檢測中,時間就是效率。傳統的端粒酶活性檢測方法往往需要數天甚至數周才能出結果,而翼和生物的端粒酶催化亞基TERT基因表達檢測試劑盒,僅需約4小時10分鐘即可完成全部檢測流程。
這么快的速度是如何實現的?讓我們來拆解一下整個實驗流程。
第一階段:RNA抽提(約60分鐘)實驗從細胞樣本開始,首先需要抽提總RNA。翼和生物推薦使用Trizol法或商業柱式法抽提試劑盒。對于熟練的實驗人員來說,10個樣本以內的RNA抽提大約需要60分鐘。
抽提得到的RNA需要滿足質量要求:濃度≥125ng/μl,OD260/280比值在1.8-2.0之間。這樣才能保證后續反轉錄和qPCR的質量。
第二階段:反轉錄(約60分鐘)得到高質量RNA后,接下來是反轉錄反應,將RNA反轉錄成cDNA。翼和試劑盒配套了特異性逆轉錄引物,能夠特異性地逆轉錄TERT基因的mRNA,提高檢測的特異性。
反轉錄反應程序為:20℃ 10分鐘→42℃ 1小時→72℃ 5分鐘。整個過程約60分鐘。
第三階段:qPCR體系配制(約30分鐘)反轉錄完成后,需要將cDNA進行4倍稀釋,然后配制qPCR反應體系。翼和試劑盒采用預混液形式,只需將qPCR Mix、引物探針混合液、樣本cDNA和水按比例混合即可,操作非常簡便。
10個樣本的體系配制大約需要30分鐘。值得一提的是,試劑盒采用雙色熒光檢測,FAM通道檢測TERT基因,Cy5通道檢測內參基因GAPDH,單管即可完成兩個基因的檢測,大大節省了樣本和試劑。
第四階段:上機檢測(約100分鐘)體系配制完成后,就可以上熒光定量PCR儀進行檢測了。擴增程序為:94℃預變性5分鐘,然后95℃變性15秒、58℃退火45秒、72℃延伸1分鐘,共40個循環。72℃延伸時收集熒光信號。
整個擴增過程約100分鐘。擴增結束后,儀器會自動給出Ct值,根據Ct值就可以判斷樣本的端粒酶活性是陽性還是陰性。
總計:4小時10分鐘四個階段加起來,10個樣本以內的檢測僅需約4小時10分鐘。如果是批量樣本,還可以實現流水線操作,效率更高。
相比傳統TRAP法需要數天、裸鼠成瘤試驗需要16周,翼和生物的端粒酶檢測試劑盒在效率上具有壓倒性優勢,是快速篩查的理想工具。



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