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TRAP法 vs hTERT基因表達法：端粒酶檢測該選哪種？
發布時間： 2026-09-01 點擊次數： 49次在端粒酶活性檢測領域，主要有兩大類技術路線：一類是直接檢測端粒酶活性的TRAP法（端粒重復擴增法），另一類是通過檢測hTERT基因表達量間接反映端粒酶活性的基因表達法。面對這兩種方法，科研工作者該如何選擇？
TRAP法：經典但繁瑣TRAP法是最早發展起來的端粒酶檢測方法，其原理是利用端粒酶能在引物末端添加端粒重復序列的特性，通過PCR擴增后檢測產物量來反映端粒酶活性。基于TRAP法又衍生出多種變體，如Real-time TRAP、TRAP-ELISA、雜交保護分析-TRAP法等。
然而，TRAP法存在明顯的缺點：
• 操作復雜，耗時耗力：需要抽提蛋白、進行端粒延伸反應，然后再做qPCR或跑電泳或雜交，實驗步驟繁多。
• 結果不穩定：抽蛋白過程中很容易導致端粒酶活性喪失，對實驗操作要求高。
• 引物特異性較差：RQ TRAP SYBR法和TRAP Amplifluor法的引物特異性不足，檢測靈敏度不高；ELISA方法精密度不足、重復性不好。
hTERT基因表達法：簡便且靈敏hTERT基因表達法的原理是：hTERT（端粒酶逆轉錄酶）是端粒酶的催化亞基，其mRNA表達水平與端粒酶整體活性高度一致。通過檢測hTERT基因的mRNA表達量，可以間接反映端粒酶活性。
相比TRAP法，hTERT基因表達法具有明顯優勢：
• 操作簡單：只需RNA抽提→反轉錄→qPCR三個步驟，實驗流程清晰。
• 結果穩定：RNA比蛋白更穩定，不易降解，實驗重復性好。
• 靈敏度更高：文獻報道（Mantripragada et al. 2008），hTERT基因表達量的靈敏度要高于TRAP法。
• 可定量檢測：通過標準曲線可以實現精確定量。
翼和生物的技術優勢上海翼和生物的端粒酶催化亞基TERT基因表達檢測試劑盒，采用雙色熒光TaqMan探針法，相比普通SYBR Green法的hTERT檢測，結果穩定性更好；并且采用兩套檢測系統信號增強，靈敏度比普通hTERT法更高。
此外，試劑盒配套端粒酶活性陽性對照標準品（293T細胞）和陰性對照標準品（MRC-5細胞），既可定性判斷也可定量判斷，是科研工作者的理想選擇。
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主營產品：主要技術服務：細胞STR鑒定；支原體檢測；細胞種屬檢測；端粒長度檢測；端粒酶活性檢測等。
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